Как не печатать повторяющиеся строки из внешнего текстового файла?

Использовать этот:

questions = random.sample(quiz, 10)

Он выберет случайный подсписок длиной 10 из списка викторин.

Также:

Вы должны прочитать файл и сделать список вопросов вне цикла, а затем просто перебрать вопросы:

with open('space_quiz_test.txt') as f:
    quiz = f.readlines()

questions = random.sample(quiz, 10)
for question in questions:
    ...

Вместо того, чтобы открывать файл 10 раз, возьмите из него 10 вопросов и циклически задавайте их:

def get_questions(fn, number):
    with open(fn) as f:

        # remove empty lines and string the \n from it - else you get 
        # A\n as last split-value - and your comparisons wont work
        # because A\n != A
        q = [x.strip() for x in f.readlines() if x.strip()]
    random.shuffle(q)
    return q[:number]


def quiz():
    i = 0 
    global score # makes the score variable global so it can be used outside of the function
    score=0 # defines the score variable as '0'

    q = get_questions('space_quiz_test.txt', 10) # gets 10 random questions
    for question in q:
        detail = question.split(",")
        print(detail[0],detail[1],detail[2],detail[3],detail[4],detail[5])
        print(" ")
        # etc ....

Доку:

• перетасовка списка на месте: random.shuffle

Есть еще несколько вещей, которые нужно исправить:

# global score  # not needed, simply return the score from quiz():
my_score = quiz() # now my_score holds the score that you returned in quiz()
...

# logic errors - but that part can be deleted anyway:
elif detail[0] in qno is True:       # why `is True`? `elif detail[0] in qno:` is enough
    if detail[0] not in qno == True:    # you just made sure that `detail[0]` is in it

... 


 while True:
        answer=input("Answer: ").upper()           # make it upper once here
        if answer not in ('A','B','C','D'):        # and remove the .upper() downstream
            print("Answer not valid, try again")
        else:
            break

Вы можете добиться этого, рисуя вопросы сразу с выбором без замены, а затем перебирая их.

import numpy as np
quiz=open('space_quiz_test.txt').read().splitlines() #opens the file containing the questions, reads it and then splits the lines to make them seperate entities
questions=np.random.choice(quiz, size=10, replace=False)
    for question in quesions: #creates a loop that makes the program print 10 questions
         #rest of your code

Прочитайте все вопросы:

with open('space_quiz_test.txt') as f:
    quiz = f.readlines() 

Перемешайте список вопросов на месте:

random.shuffle(quiz)

Цикл по перетасованному списку:

for question in quiz:
    print(question)

Это потому, что random.choice может давать один и тот же результат более одного раза. Вместо использования random.choice попробуйте random.shuffle(list), а затем выбрав первые 10 записей из перемешанного списка.

quiz=open('space_quiz_test.txt').read().splitlines()
random.shuffle(quiz)
for question in quiz[1:11]:
        detail = question.split(",")
        print(detail[0],detail[1],detail[2],detail[3],detail[4],detail[5])