Могу ли я использовать Python вместо JavaScript?

Этот вопрос очень общий и недостаточно конкретный для SO. Тем не менее, ознакомьтесь с онлайн-материалами о веб-разработке на Python, например, fullstackpython.com/web-development.html

Это зависит от того, для чего вы хотите его использовать. Если вы хотите, чтобы он заменил серверную часть, написанную на JavaScript, например, написанную на Node.js, тогда, конечно, вы можете использовать вместо нее Python. Но особенность JavaScript в том, что его может запустить любой браузер. Но Python так не работает. Таким образом, вы не можете заменить динамический JavaScript на самих веб-страницах. Однако на самом деле вы не совсем четко определили, для чего вам это нужно, поэтому невозможно сказать, осуществимо ли то, о чем вы просите, без получения нами дополнительной информации.